本文对传统血管统灌注技术进行改良,不须分割脱钙,以猪离体股骨头标本为例介绍其骨头骨内血管显微灌注研究方法。以期为股骨头骨内血管研究提供参考。
离体股骨头动脉显微灌注技术方法邱兴1,程亮亮1,王本杰1,杨磊1,赵德伟1
医院骨科,辽宁大连
目的探索猪股骨头标本离体后支持带动脉显微灌注技术方法。方法显微镜下对12例离体猪股骨头标本显微灌注,显微CT扫描;血管三维重建。结果通过下支持带动脉对离体猪股骨头显微灌注及骨内血管三维重建。构建离体股骨头的数字化三维模型,可精确、清晰呈现股骨头内动脉主干及其分支的形态结构。结论离体猪殷骨头动脉显微灌注及骨内血管三维重建能够清晰显示猪股骨头骨内的血管。为殷骨头缺血性坏死研究提供形态学基础。
股骨头;骨内血管;显微灌注;显微CT;三维
R.34
A
10./j.issn.l-x..04.
骨内血液供应在骨的生长和修复重建过程中输送营养物质营养骨内细胞,骨内血管结构对骨细胞具有重要意义。传统研究骨内微血管的结构研究方法,通常需要先行骨内微血管造影然后对标本分割脱钙,X线摄影进行观察,耗时长,血管重建困难,不便于作为一个整体对其研究,不便于进行血管管径测量,具有一定的局限性[1]。正常尸体局部完整的标本可通过股动脉等大血管灌注显微CT扫描,不破坏骨质重建骨内血管,对骨结构和骨内血管进行研究[2]。研究对象多为正常整体的尸体解剖组织结构研究[2-4]。离体股骨头标本骨内血管研究的技术方法报道较少,需要先分割脱钙处理,耗时长[5]。本文对传统血管统灌注技术进行改良,不须分割脱钙,以猪离体股骨头标本为例介绍其骨头骨内血管显微灌注研究方法。以期为股骨头骨内血管研究提供参考。
1材料与方法1.1实验标本12例保留部分支持带动脉的猪离体股骨头标本。平均1年龄。医院伦理委员会的批准。
1.2实验试剂与仪器
西门子InveonMM系统MicroCT。图像后处理软件为InveonResearchWorkplace(IRW),Mimics14.0。恒压灌注装置(自制)。德国莎哈利本化学有限公司(SachtlebenChemieGmbH)亚纳米级硫酸钡(BlancFixeMicro),颗粒直径nm。Sigma公司明胶(产品编号V|CAS号-70-8)。
1.3造影剂配制及灌注方法
80℃水浴下将明胶融化制成5%明胶溶液,调整水浴温度至37℃,加入硫酸钡制成30%硫酸钡混悬液ml备用[2]。
12例离体新鲜猪股骨头标本,灌注方法参考并改良股骨头骨内血管定量研究。(1)显微镜下放大倍数约8倍,在下支持带动脉即将进入股骨头处插入外径φ0.4mm灌注导管针并结扎固定。(2)标本置于37℃水浴箱中,用恒压灌注装置将灌注液以恒压(~mmHg)注入,灌注过程持续20min。(3)结扎支持带动脉并将标本置于0℃水浴20min。待明胶充分固化,取出股骨头标本。
1.4Micro-CT扫描及骨内血管重建
标本固定于扫描床后Micro-CT扫描股骨头。InveonCT采集协议为:Binningl,SystemMagnificationlow-med,TotalRotation,Real-timeReconstruction,Downsamplefactor2,扫描分辨率为24.37μm,ExposureTimems。InveonCT系统白带的扫描重建软件COBRA生成原始数据。导人影像分析软件Inveonresearchworkplace(IRW)生成并导出Digitalimagingand北京中科白瘕风刘云涛中科白癜风公益惠民活动